Abordagem conservadora de lesões cariosas profundas: uma revisão de literatura / Conservative approach to deep carious lesions: a literature review

O presente trabalho tem como objetivo realizar uma revisão de literatura e discutir os mais atuais conceitos sobre abordagem conservadora de lesões cariosas profundas, facilitando o manejo clínico. Para que essa abordagem conservadora seja implementada, é imprescindível que se conheça a composição estrutural e funcional do biofilme para, assim, entender a evolução da doença cárie que acomete a estrutura dentária. No entanto, quando se trata de um dente com lesão de cárie ativa com grande comprometimento de esmalte e dentina, procedimentos operatórios mais invasivos e restauradores podem ser necessários, mesmo que fundamentados na maior preservação possível de estrutura dentária. As evidências mais atuais encontradas na literatura recomendam a remoção seletiva do tecido cariado que consiste na dentina infectada, ou seja, clinicamente amolecida, e restauração definitiva na mesma sessão. Portanto, desde que o dente apresente vitalidade pulpar clinicamente confirmada, acredita-se que a preservação estratégica da dentina, poderá aumentar as chances de sucesso no tratamento, evitando possível exposição da polpa dentária. Adicionalmente, ao optar por práticas conservadoras no contexto da Odontologia de mínima intervenção, resultará em um significativo aumento na longevidade das restaurações sempre associando promoção de saúde ao paciente(AU)

This paper aims to conduct a literature review and discuss the most current concepts on conservative approach to deep carious lesions in permanent posterior teeth, facilitating clinical management. For this conservative approach to be implemented, it is essential to know the structural and functional composition of the biofilm in order to understand the evolution of the caries disease that affects the dental structure. However, when it comes to a tooth with an active caries lesion with major enamel and dentin compromise, more invasive and restorative surgical procedures may be necessary, even if based on the greatest possible preservation of the dental structure. The most current findings in the literature recommend the selective removal of carious tissue consisting of infected dentin, that is, clinically softened, and definitive restoration in the same session. Therefore, as long as the tooth has clinically confirmed pulp vitality, it is believed that the strategic preservation of dentin may increase the chances of successful treatment, avoiding possible exposure of the dental pulp. Additionally, when opting for conservative practices in the context of Minimally Invasive Dentistry, it will result in a significant increase in the longevity of restorations, always associating health promotion to the patient(AU)

Extraction and purification of RNA from human carious dentine: an approach to enable bacterial gene expression studies / Extração e purificação de RNA proveniente de dentina humana cariada: uma abordagem para viabilizar estudos de expressão gênica

Background: RNA isolation from bacteria within dentine caries lesions could be difficult due to reduced amount of collectable biomass and high mRNA instability. Attempting to overcome this challenge we describe one protocol developed to extract and purify total RNA from dentine lesions. Objective: customize a bacterial RNA extraction and purification method from human carious dentine. Methods: quantity and purity of extracted RNA were measured with a microvolume UV-VIS spectrophotometer, RNA integrity was assessed by standard denaturing agarose gel electrophoresis and images were captured under ultraviolet light with camera and analyzed. DNase treatment removed genomic DNA and an additional step of purification was carried out in silica spin column. Results: final yield (ng/µl) was 67.01 ± 22.33, absorbance ratio A260/A280 = 2.0 ± 0.07 and RNA integrity were obtained. The purified samples were reversely transcribed and the expression of atpD and fabM gene from Streptococcus mutans analyzed by quantitative real-time PCR. Conclusion: the extraction methodology developed produced high-quality RNA from dentine microbiota for transcriptional analysis.

Introdução: o isolamento de RNA de bactérias dentro de lesões de dentina cariada pode ser difícil devido à quantidade reduzida de biomassa e alta instabilidade de mRNA. Na tentativa de superar esse desafio, descrevemos um protocolo desenvolvido para extrair e purificar o RNA total das lesões dentinárias. Objetivo: personalizar um método de extração e purificação de RNA bacteriano a partir da dentina cariada humana. Métodos: a quantidade e a pureza do RNA extraído foram medidas com um espectrofotômetro UV-VIS de microvolume, a integridade do RNA foi avaliada por eletroforese em gel de agarose desnaturante padrão e as imagens foram capturadas sob luz ultravioleta e analisadas. O tratamento com DNase removeu o DNA genômico e uma etapa adicional de purificação foi realizada em coluna de spin de sílica. Resultados: o rendimento final (ng / µl) foi de 67,01 ± 22,33, a razão de absorbância A260 / A280 = 2,0 ± 0,07 e a integridade do RNA foram obtidas. As amostras purificadas foram transcritas reversamente e a expressão do gene atpD e fabM de Streptococcus mutans analisadas por PCR quantitativo em tempo real (RT-qPCR). Conclusão: a metodologia de extração desenvolvida produziu RNA de alta qualidade da microbiota dentinária para análises transcricionais.